澳门新葡亰app网站-娱乐场手机版官网 关于新葡亰 可视成像地下金属探测器 德国OKM,PCR仪工作原理利用升温使DNA变性

可视成像地下金属探测器 德国OKM,PCR仪工作原理利用升温使DNA变性

发布时间:17-05-03 14:49分类:技术文章 标签:PCR仪,PCR仪百科简介
摘要:简单的说,PCR*是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。PCR简介PCR的要素基本的PCR须具备1.要被复制的DNA模板
Template2.界定复制范围两端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq.
Polymearse4.合成的原料(四种脱氧核苷酸)及水。PCR仪工作原理利用升温使DNA变性,用限制性内切酶使DNA双链解链,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制的目的PCR的反应包括三个主要步骤分别是1.
Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。 所谓
Denaturing乃是将DNA加热(至90~95℃)变性,
将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板. 而Annealing 则是令
Primers于一定的温度下(冷却至55~60℃)附着于模板DNA两端。
*后在DNA聚合酶e.g. Taq-polymerase 的作用下(加热至70~75℃)进行引物的延长
Extension of
primers及另一股的合成。PCR的*早设想核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年*早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。PCR的实现1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis
等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。其原理类似于DNA的体内复制PCR的改进与完善Mullis*初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌
DNA 聚合酶 I 的Klenow片段,其缺点是:①Klenow酶不耐高温,
90℃会变性失活,每次循环都要重新加。②引物链延伸反应在37℃下进行,容易发生模板和引物之间的碱基错配,其PCR产物特异性较差,合成的DNA片段不均一。此种以Klenow酶催化的PCR技术虽较传统的基因扩增具备许多突出的优点,但由于Klenow酶不耐热,在DNA模板进行热变性时,会导致此酶钝化,每加入一次酶只能完成一个扩增反应周期,给PCR技术操作程序添了不少困难。这使得PCR技术在一段时间内没能引起生物医学界的足够重视。1988年初,Keohanog改用T4
DNA聚合酶进行PCR,其扩增的DNA片段很均一,真实性也较高,只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次,仍需加入新酶。1988年Saiki
等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌thermus aquaticus
中提取到一种耐热DNA聚合酶。此酶具有以下特点:①耐高温,在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%,在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%,在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。②在热变性时不会被钝化,不必在每次扩增反应后再加新酶。③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率,增加了扩增长度2.0Kb。由于提高了扩增的特异性和效率,因而其灵敏性也大大提高。为与大肠杆菌多聚酶IKlenow片段区别,将此酶命名为TaqDNA多聚酶Taq
DNAPolymerase。此酶的发现使PCR广泛的被应用。PCR仪的分类普通的PCR仪把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,叫传统的PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是做简单的,对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科研研究,教学,医学临床,检验检疫等机构。梯度PCR仪把一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),通常有12种温度梯度,这样的仪器*叫梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段,其*适退火温度事不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增,*可以筛选出表达量高的*适退火温度,进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样节约成本的同时也节约了时间。主要用于科研,教学机构。梯度PCR仪,在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增。原位PCR仪用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪,如病源基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。是保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在的位置上进行基因扩增,不但可以检测到靶DNA,又能标出靶序列在细胞内的位置,于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有重大的实用价值。实时荧光定量PCR仪在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,*成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。把这PCR仪叫做实时荧光定量PCR仪(qPCR仪)。荧光定量PCR仪有单通道,双通道,和多通道。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道,有多荧光标记的时候用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记的目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。该仪器主要用于医学临床检测,生物医药研发,食品行业,科研院校等机构。获得诺贝尔奖的PCR技术1995年,美国科学家Mulis众望所归地获得了诺贝尔化学奖,他所取得的成*是发明了PCR技术。PCR,中文译为聚合酶链式反应,其实是一种DNA的快速扩增技术,其扩增效率之高*象核裂变的“链式反应”那样。PCR技术通过两个短的称为引物的
DNA小片段和一种耐热的酶的作用,可以在3个小时内把特定的DNA量提高1000万倍。这种技术一问世,立刻引起了分子生物学研究的一场革命,人们利用
这种轰动全的技术很快*把微观领域的生物学研究大大地往前推了一步。可以这么说,PCR技术使分子生物学研究一下子获得了突破,而且随着PCR技术的
日趋完善,PCR在人类社会生活中的应用也越来越广泛。比如说在“DNA指纹”
中我们提到,科学家们只需要一根头发甚至一个细胞*可以完成DNA指纹的鉴定工作,这里实际上*要采用PCR技术,因为一个细胞中的DNA含量实在太少
了,人们根本不可能检测到它的指纹;有了PCR技术*好办了,通过PCR技术把这个细胞中的DNA片断扩增1000万倍,这样DNA量*足够作指纹鉴定了。
再比如,在医院里检验血液中的某种病毒,有时病毒量极少(例如有的艾滋病病毒携带者),通过传统的检查方法费力又费时,这时PCR技术也许*可以帮上忙。
可以*选定这种病毒DNA上的一段DNA,设计合适的引物DNA,然后通过PCR技术一扩增很快*可以判断出血样中是否扩增出了大量的DNA,如果是的
话,那么*说明血样中带有该种病毒了。PCR方法不但有极高的灵敏度,而且可以同时一次做近百个扩增反应,省时省力效率高。PCR技术神奇*神奇在以下几个特点上:一是被扩增的DNA所需量极小,理论上讲一个分子*可以用于扩增了;二是扩
增效率高,目的基因的量成指数形式扩增,几个小时*扩增1000万倍以上。现在PCR技术已经被广泛地应用于生命科学研究、食品卫生、医疗、法医及环境监
测等诸多方面,真不愧是“获得诺贝尔奖”的好技术!北京熙缜隆博环保科技有限公司是经销进口仪器设备的供应商,我们的产品优惠,质量保证,原装进口,欢迎前来选购!

发布时间:17-05-04 15:13分类:行业资讯
标签:德国OKM可视成像地下金属探测器,可视成像地下金属探测器 德国OKM
GmbH公司成立于1998年,是可视成像地下金属探测器主要生产厂商。德国OKM公司成立至今,研发生产的可视成像探测器已经风靡全,不管是探测深度还是成像的效果,目前全没有一家制造厂商能够超越OKM。德国OKM
GmbH公司生产的可视成像探测器不仅可以寻找地下埋藏的洞穴、隧道、遗迹和墓穴,还可以探测地下埋藏的金属宝藏和金属矿藏。无论您是考古专家还是探宝爱好者,亦或是开矿人,OKM都会向您提供*的探测仪器和*的指导。爱仪器仪表网新加盟的德国OKM地下金属成像探测器主要有:金枪X4远程地下金属探测器、捷豹探地雷达探测器、漂泊者系列、黑鹰脉脉冲仪、EXP5000探测器、EXP4000探测器和CavefinderB可视成像探测器等。黑鹰脉冲仪采用*新的脉冲磁感应技术,通过艰辛的研究和测试,新脉冲感应金属探测器为德国OKM公司*新研发,自动地面平衡,操作方便,易携带,电池寿命长。寻找沙金,颗粒金,寻宝探矿。黑鹰脉冲感应探测器能够让用户轻松定位贵金属,深度可达金属探测器可达范围。该探测器配备寻宝专家,经简化实现全效率运行,即开即用。为熟悉黑鹰探测器的操作,您不需要花几个月的时间去练习。要了解黑色金属和有色金属。在对探测器进行地平衡操作的过程中,一半是自动完成的,只需要拨入设定值并按钮即可。这种高功率探测器能找到超过45cm(18″)深处的单个金块以及较大的金质和银质物体,比如超过8m(26″)深处的藏宝箱。这是通过产生高能涡流来完成的,高能涡流让探测器能够扫描到较深位置。另一个优势在于脉冲感应探测器可以在几乎所有类型的地形上使用,对铁矿或黑砂不会产生任何反应。*新的捷豹探地雷达探测器(Gepard
GPR – Ground Penetrating
Radar)捷豹探地雷达探测器是由*的探测技术研发而成,配置一台10.1寸的安卓系统的平板电脑,大大的提高了机器的操作与携带。这款仪器相比一般普通的探测器来说,拥有更高的灵敏度和更好的成像效果。Gepard探地雷达采用全方位非屏蔽传输系统,*大探测深度可达40米。捷豹是一种轻便易携带的强力探地雷达,可用于探测地下的管道、空洞、缆线、坑道、工事等物体。它使用的全向探测系统给,足以发现地下深至40米的异常信号。扫描筛选功能:通过*进的Gepard
GPR捷豹软件,只要触碰筛选图标,*可以隐藏信号值相同或者相近的信号,使您更清楚地看到您的目标。可自定义的显示色彩:Gepard捷豹软件提供了多种数据显示色彩方案,在常规模式和筛选模式下都可以使用,使数据分析更快更容易。GPS追踪与地图功能:Gepard捷豹软件为您提供了各种确定方位的工具,可以将探底雷达数据与谷歌地图和GPS数据进行整合,在地图画面上精确地标识出测量地点。声音识别功能:Gepard捷豹内建有发声功能,使您能够察觉信号中的任何变化。当您从地下物体上方经过时,*能听到信号出现改变,使您能更容易地发现目标。漂泊者黄金可视成像探测器是2013年德国OKM重磅推出的*专门寻找探测金银以及其他丰富矿藏的探测器。它*强大的功能*是简化漂泊者C和漂泊者CII操作方法,并且增强了探测空洞的效果。这款机器上市后,再次震惊全的可视成像探测器生产厂商,无不惊叹,再次的登上全球行业领航*锋,它在矿山和矿藏环境中的运用时*的。在各种矿山、黄金丰富的地方,如苏丹,坦桑尼亚,马来西亚等地方,经过多年的试验。了解更多地下金属探测器产品信息,请登录www.ai1718.com!

发布时间:17-05-03 14:50分类:技术文章
标签:PCR仪,我想问一下PCR仪有哪些种类,如何选购
摘要:PCR仪的种类有很多,据我所了解的大致有四种,普通的PCR仪、原位PCR仪、梯度PCR仪、实时荧光定量PCR仪,这些产品爱仪器仪表网上面都有卖的,如果你想购买PCR仪的话,我建议你不妨去爱仪器仪表网咨询下!PCR仪的种类分类总是五花八门,总体来说可以分为PCR扩增仪和实时荧光PCR仪两大类,有人也把它们称为半自动和全自动,或者定性和定量,都是比较不准确的称呼。PCR*重要的*是个升降温过程,*初的水浴锅式PCR,*是三个水浴箱,一个机械臂,定时抓出反应槽转换水浴锅。这种东东体积大,迅速慢,但其实结果并不比以后的PCR仪差,我现在都很欣赏。后来有人利用致冷和加热做成了,固定位置升降温的PCR扩增仪。后来随着定量技术的发展,有公司将扩增仪和检测做成一体,也*成了现在所谓的全自动(或定量)PCR仪。当然标准的叫实时荧光定量PCR仪。品牌什么东西都有品牌,现在国内国外PCR仪的品牌很多,*国外而言比较著名的有:ABI美国应用生物公司:老牌的生物公司贵族,其收购了原来的PE,而PE公司是PCR的鼻祖,旗下有很多经典的PCR仪,有5700(已停产)、7700(已停产)、7000、7900等实时荧光定量PCR仪。ROCHE罗氏诊断:炙手可热的新贵,LIGHTCYCLER是其*的PCR仪,市场做得很不错,以科研定位为主,但在国内很多医院使用,其很特色离心、气加热、毛细管等,设计另类,是*有特色的PCR仪,当然好坏另议,*单其另辟蹊径的技术能力和胆识*值的佩服。MJ:刚入中国的名流,MJ的扩增仪在生命科研领域比较出名,其产品比较适合高通量检测,人类基因组计划用得很多。其实时荧光PCR仪刚进入中国不久,孔间能使用不同温度是其特色。这点其实比较有用。伯乐:呵,廉价的麦当劳,ICYCLER是其主打,进入中国已经比较久了,产品和5700一样,是扩增仪上加装定量模块而成,特点是价格较低。国内现在做的也很多,比如北京熙缜隆博环保科技有限公司等。选购准确的讲包括实时荧光定量在内都没有自动加样和标本处理系统,只能算半自动的。PCR仪是个简单的东东,一个温控设备和一个检测设备而已。关于温控,主要是介质问题。理想的介质是导热性好、比热大、接触紧密的东东。这方面*好的是水浴和油浴,比热大(油比水更大)、溶剂化物体,与反应物无缝接触,效果当然*好。但是自动化,小型化难,只有*初的水浴锅式使用。硅加热,这是使用*普遍的一种,优点:易自动化、速度快、直接加热降温,效果当然好,但是*成本较高,第二其使用的介质是金属,导热虽然好,但是与反应管,很难做到无缝接触,定性时代可以加油,但用荧光定*,由于油有荧光信号不能用。所以在无缝接触上差一些。第三由于是底部加热,下部压力较大,有溢出的可能,不过新的仪器在加热盖以后解决了这个问题。空气加热,用空气做介质有优点,与反应体系无缝接触,但是空气的导热性差、比热小的弱点明显。因此空气加热的要利用离心来产生空气流动,增强导热性,同时使用毛细管,加大接触面积、试剂微量化来弥补。这样做了以后效果还是不错。但有的厂商把什么离心、毛细管的好处大讲特讲,对气加热的弱点闭口不谈,却是高明的市场手法。同时,使用离心,对标本量增大是有影响的并且标本量越大,空气比热小的弱点*越明显,所以空所加热的仪器标本量都比较小。使用毛细管后由于反应液与管的接触面积增大,吸附现象更大,因此试剂的通用性差一般要专门开发,成本高,虽然试剂用量少,但因为是专用试剂,每人份*是以实际量算,并不省试剂。反而增加了毛细管成本。关于功能,所有的PCR仪功能都大体相同。只有MJ孔间能使用不同温度比较*特,这对于多项目同时检测以及循环参数的调整比较有用。但其实时荧光的仪器刚进入中国不久,具体如何还不得而知。关于选购,根据单位情况而定,由于PCR的技术含量其实并不高,好的国产仪器如杭州博日(与日本著名厂商大和有关)也差不太多。关于进口仪器,罗氏的仪器不错,但如果标本量大,建议不要用罗氏。一则会累死的。另外,每个标本要分摊的标准曲线、对照成本太高。同时,试剂也比较受限。如果您想了解有关PCR仪的相关问题,可以直接登录www.ai1718.com网站,或者直接拨打爱仪器仪表网客服热线010-68940148,我们会真诚的为您服务的。

标签:, , , , , , , , , ,

发表评论

电子邮件地址不会被公开。 必填项已用*标注

相关文章

网站地图xml地图